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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
HEK293細胞轉染(rǎn)試劑(jì),PEI Prime是以一(yī)種(zhǒng)陽離子高分(fēn)子(zǐ)聚(jù)合物(wù)-聚乙(yǐ)烯(xī)亞胺(polyethylenimine,PEI)為載體的基(jī)因轉(zhuǎn)染試(shì)劑。
產(chǎn)品(pǐn)分(fēn)類
產(chǎn)品名(míng)稱(chēng):HEK293細(xì)胞(bāo)轉染試劑(jì)
產品簡(jiǎn)介(jiè):
PEI綫(xiàn)性(xìng)轉染試(shì)劑(PEI Prime Powder, Transfection Grade Linear Polyethylenimine):PEI Prime是(shì)以一(yī)種陽離(lí)子高分子聚合(hé)物(wù)-聚乙烯亞(yà)胺(polyethylenimine,PEI)為(wéi)載(zǎi)體(tǐ)的基因轉染(rǎn)試(shì)劑(jì)。PEI是在(zài)pH中(zhōng)性(xìng)溶(róng)液(yè)中具有(yǒu)*正電(diàn)荷密度的(dí)合成(chéng)聚合物。帶(dài)正(zhèng)電的(dí)PEI與帶(dài)負(fù)電(diàn)的DNA牢固(gù)結合,並賦予(yú)淨陽(yáng)離(lí)子電(diàn)荷,使(shǐ)DNA進入(rù)細胞(bāo)。PEI Prime是一(yī)種高(gāo)性能轉染(rǎn)試劑,利(lì)用PEI的特(tè)性(xìng)旨在實現高產(chǎn)量,可(kě)重復(fù)性(xìng)和可(kě)擴展的瞬時基(jī)因(yīn)表達(dá)。
應(yīng)用範(fàn)圍:
PEI轉染(rǎn)試(shì)劑(jì)能(néng)夠(gòu)高(gāo)效(xiào)率轉(zhuǎn)染(rǎn)多(duō)種細胞(bāo)係,包括貼壁(bì)細胞和(hé)懸浮(fú)細胞(bāo)。此外,PEI是用於HEK293和(hé)CHO懸(xuán)浮細(xì)胞(bāo)轉染(rǎn)的(dí)試劑。PEI轉染試(shì)劑是(shì)生(shēng)產(chǎn)任何(hé)具有成本效(xiào)益(yì)的(dí)生物製(zhì)劑的合適選擇,包(bāo)括重(zhòng)組蛋白,抗(kàng)體(tǐ)和(hé)病毒。
PEI綫(xiàn)性(xìng)轉(zhuǎn)染(rǎn)試劑產(chǎn)品優勢:
1. 低毒(dú),高(gāo)效
2. 操作簡(jiǎn)單(dān),高性價(jià)比
3. 可提供可(kě)靠,具(jù)有(yǒu)可(kě)重復(fù)性的轉染結(jié)果(guǒ)
4. 適(shì)用(yòng)於快(kuài)速(sù),高通量(liáng)轉(zhuǎn)染流程
轉染步驟(zhòu):
-以HEK293貼(tiē)壁(bì)細胞為(wéi)例(lì),步(bù)驟如下(xià):
1. 細胞接種:細胞(bāo)密度(dù)2-6 x106 cells/mL。
2. 質(zhì)粒(lì)的(dí)準(zhǔn)備(bèi):在5%最終(zhōng)培養體積的DMEM或培養基中(zhōng),每106個細胞稀(xī)釋1.0 ug pDNA。
3. PEI的準(zhǔn)備(bèi):在(zài)5%最(zuì)終(zhōng)培養體積的DMEM或培(péi)養基中,每(měi)106個(gè)細(xì)胞(bāo)稀釋(shì)3.0 ug PEI Prime,混匀(yún)。
4. 通(tōng)過快(kuài)速(sù),短(duǎn)暫(zàn)渦旋(xuán)或顛倒(dǎo)數(shù)次試(shì)管(guǎn),將(jiāng)pDNA和PEI Prime溶液混合在一(yī)起。
5. 使pDNA和PEI的混合(hé)物(wù)在(zài)室(shì)溫下靜(jìng)置10分鐘。
6. 一邊旋(xuán)轉(zhuǎn)板(bǎn),一邊(biān)將pDNA和(hé)PEI混合物逐(zhú)漸滴加(jiā)到(dào)細胞(bāo)中。
7. 於37℃ CO2培養(yǎng)箱中(zhōng)培養(yǎng)。

轉(zhuǎn)染(rǎn)的優化:
為(wéi)達(dá)到(dào)高轉染效(xiào)率和低細胞毒(dú)性的理想結果,可(kě)以(yǐ)進行如(rú)下(xià)優化:
參數 | 範(fàn)圍 |
PEI濃度(dù) | 3.50-6.50mg/(L final culture) |
DNA濃度 | 0.75-1.5mg/(L final culture) |
PEI/DNA混匀時間 | 5.0-15.0minutes |
與市場(cháng)同類品牌(pái)的(dí)PEI轉(zhuǎn)染效率(shuài)的(dí)對比:
使用(yòng)PEI Prime(PEI:DNA濃度(dù)比3:1)或某國(guó)外品牌(pái)PEI,用CMV-SEAP質粒轉(zhuǎn)染20ml 含(hán)HEK293懸浮細胞的培養物(wù)。 轉(zhuǎn)染後(hòu)5天,使用(yòng)磷(lín)酸酶報(bào)告染料(liào)和UV / Vis檢測(cè)SEAP表(biǎo)達水(shuǐ)平(píng)。數據表(biǎo)示占(zhān)某國外(wài)品(pǐn)牌PEI的SEAP表(biǎo)達(dá)水平的(dí)百(bǎi)分(fēn)比。結果(guǒ)顯(xiǎn)示(shì)我們的PEI Prime 的轉染效率比國(guó)外同(tóng)類廠家高(gāo)出(chū)40%。

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