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服(fú)務熱(rè)綫：
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產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
產品簡(jiǎn)介(jiè)
PEI瞬時轉(zhuǎn)染(rǎn)試劑，PEI Prime是(shì)以一種(zhǒng)陽離(lí)子高分子聚合物-聚(jù)乙(yǐ)烯(xī)亞(yà)胺(polyethylenimine，PEI)為載體的基因(yīn)轉染試劑。
產品(pǐn)分類
產品(pǐn)名(míng)稱(chēng)：PEI瞬時(shí)轉染試(shì)劑
產(chǎn)品簡介：
PEI綫性(xìng)轉染試劑（PEI Prime Powder, Transfection Grade Linear Polyethylenimine）：PEI Prime是以(yǐ)一(yī)種陽離(lí)子高分子聚合物-聚(jù)乙烯亞(yà)胺(àn)(polyethylenimine，PEI)為(wéi)載體的(dí)基因轉染(rǎn)試劑。PEI是(shì)在(zài)pH中性(xìng)溶液(yè)中(zhōng)具(jù)有(yǒu)*正(zhèng)電荷密度(dù)的(dí)合成(chéng)聚(jù)合(hé)物。帶正電的(dí)PEI與帶負(fù)電的(dí)DNA牢(láo)固結合，並賦(fù)予淨陽(yáng)離子(zǐ)電荷，使DNA進(jìn)入細(xì)胞。PEI Prime是(shì)一(yī)種高(gāo)性(xìng)能轉染(rǎn)試(shì)劑(jì)，利用PEI的特性(xìng)旨(zhǐ)在實現高產(chǎn)量，可重(zhòng)復性和可(kě)擴(kuò)展的瞬時基因(yīn)表(biǎo)達(dá)。
應(yīng)用範圍：
PEI轉染試劑能(néng)夠(gòu)高效(xiào)率轉染多(duō)種(zhǒng)細(xì)胞係，包(bāo)括(kuò)貼(tiē)壁細(xì)胞和懸浮(fú)細胞(bāo)。此(cǐ)外，PEI是用於HEK293和CHO懸浮(fú)細胞轉染的試劑。PEI轉染(rǎn)試劑是生(shēng)產任何具(jù)有成(chéng)本效益的生(shēng)物(wù)製劑的合(hé)適選(xuǎn)擇，包(bāo)括(kuò)重組蛋(dàn)白(bái)，抗(kàng)體和(hé)病毒(dú)。
PEI綫(xiàn)性(xìng)轉(zhuǎn)染(rǎn)試(shì)劑產品優(yōu)勢(shì)：
1. 低毒(dú)，高(gāo)效(xiào)
2. 操(cāo)作簡(jiǎn)單(dān)，高(gāo)性(xìng)價(jià)比
3. 可(kě)提供(gōng)可靠(kào)，具有(yǒu)可重復(fù)性(xìng)的轉(zhuǎn)染結果(guǒ)
4. 適用於(yú)快(kuài)速(sù)，高通量轉染(rǎn)流程
轉(zhuǎn)染(rǎn)步驟(zhòu):
-以HEK293貼壁(bì)細(xì)胞(bāo)為例，步驟(zhòu)如下：
1. 細(xì)胞(bāo)接種：細胞(bāo)密(mì)度2-6 x106 cells/mL。
2. 質(zhì)粒(lì)的準備(bèi)：在5％最(zuì)終培(péi)養(yǎng)體積的DMEM或培養基中，每(měi)106個細胞(bāo)稀釋1.0 ug pDNA。
3. PEI的準(zhǔn)備：在(zài)5％最終(zhōng)培養(yǎng)體積的DMEM或(huò)培(péi)養基中，每106個細胞稀(xī)釋(shì)3.0 ug PEI Prime，混(hùn)匀。
4. 通過快(kuài)速，短暫(zàn)渦旋或顛(diān)倒(dǎo)數次試管，將(jiāng)pDNA和PEI Prime溶液混合(hé)在一起。
5. 使pDNA和PEI的混(hùn)合物(wù)在室溫下靜(jìng)置(zhì)10分鐘。
6. 一邊旋(xuán)轉(zhuǎn)板(bǎn)，一邊將pDNA和(hé)PEI混合(hé)物逐漸滴加到細(xì)胞(bāo)中。
7. 於(yú)37℃ CO2培養(yǎng)箱(xiāng)中(zhōng)培養(yǎng)。
轉(zhuǎn)染(rǎn)的(dí)優(yōu)化：
為(wéi)達到高(gāo)轉染(rǎn)效率和(hé)低細胞(bāo)毒(dú)性(xìng)的(dí)理(lǐ)想結果(guǒ)，可以進行如下(xià)優化：
參數(shù) | 範(fàn)圍 |
PEI濃度(dù) | 3.50-6.50mg/（L final culture） |
DNA濃(nóng)度(dù) | 0.75-1.5mg/（L final culture） |
PEI/DNA混匀時間 | 5.0-15.0minutes |
與市(shì)場(cháng)同(tóng)類品牌(pái)的PEI轉染效(xiào)率的(dí)對(duì)比(bǐ)：
使(shǐ)用PEI Prime（PEI:DNA濃度(dù)比(bǐ)3：1）或某(mǒu)國(guó)外品牌(pái)PEI，用(yòng)CMV-SEAP質(zhì)粒轉染20ml 含HEK293懸浮細胞的培(péi)養(yǎng)物。 轉(zhuǎn)染(rǎn)後5天，使用(yòng)磷酸(suān)酶(méi)報告染(rǎn)料和(hé)UV / Vis檢(jiǎn)測SEAP表達水(shuǐ)平。數(shù)據(jù)表示(shì)占(zhān)某(mǒu)國(guó)外品牌PEI的SEAP表達水平的(dí)百分(fēn)比。結(jié)果(guǒ)顯(xiǎn)示我(wǒ)們的(dí)PEI Prime 的轉染(rǎn)效率(shuài)比國外(wài)同類廠家高出40%。
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